新加坡研究者：非典康復(fù)者接種新冠疫苗可激發(fā)超級免疫力

新冠病毒變異,，疫苗保護(hù)效力降低，令全球疫情再次回彈,。

8月18日,，新加坡國立大學(xué)醫(yī)學(xué)院新發(fā)傳染病專家王林發(fā)團(tuán)隊在權(quán)威醫(yī)藥期刊《新英格蘭醫(yī)學(xué)期刊》（NEJM）發(fā)表的一項最新研究成果表明,，SARS（SARS-CoV-1）康復(fù)者接種mRNA新冠疫苗（“BNT162b2”）后,，體內(nèi)出現(xiàn)了高水平交叉反應(yīng)型抗體。這些抗體不僅能夠高效中和SARS,、新冠原始病毒和目前已知的幾種新冠病毒變異毒株（alpha,、beta、delta）,，還能夠中和5種以蝙蝠,、穿山甲為宿主的sarbecovirus亞屬其他冠狀病毒。

王林發(fā)團(tuán)隊在《新英格蘭醫(yī)學(xué)期刊》（NEJM）發(fā)表的研究成果

Sarbecovirus亞屬病毒最重要的生物學(xué)特征之一,，是位于病毒表面外膜的刺突糖蛋白（spike glycoprotein）,，簡稱為“S蛋白”。它容易親和宿主細(xì)胞表面的受體“ACE2”,，引發(fā)感染,，是介導(dǎo)病毒入侵人體細(xì)胞的重要組成部分，也是使得人體內(nèi)產(chǎn)生保護(hù)性抗體“中和抗體（NAbs）”的主要誘因,。S蛋白上的突變,，往往直接決定冠狀病毒的傳播能力和逃逸能力。

科研人員指出,，這項研究不僅為廣譜抗冠狀病毒疫苗和抗體藥物的研發(fā)帶來了希望,，還將為人類預(yù)防尚未暴發(fā)的其他冠狀病毒大流行奠定基礎(chǔ)。

8月19日,，杜克—新加坡國立大學(xué)醫(yī)學(xué)院教授,、澳大利亞技術(shù)科學(xué)與工程院院士、美國微生物科學(xué)院院士王林發(fā)接受澎湃新聞（www.thepaper.cn）專訪時表示,，目前這一研究技術(shù)已申請專利,，并與相關(guān)制藥公司洽談廣譜冠狀疫苗的研發(fā)事宜。若進(jìn)展順利,，采用這一技術(shù)的mRNA疫苗加強針有望最快在今年年底至明年上半年問世,。

王林發(fā)認(rèn)為，假如我們給新冠康復(fù)的病人,，或打過新冠疫苗的健康者注射含SARS病毒的人工疫苗,，則可以誘導(dǎo)或激發(fā)廣譜的中和抗體。

“接下來還有更重要的事等著我,?！弊鳛樾律《炯靶律腥拘约膊⊙芯款I(lǐng)域的國際頂尖專家，王林發(fā)和蝙蝠這一古老生物打了數(shù)十年交道,，他表示,，新冠病毒起源是他的“心結(jié)”，也是之后的研究重點,。就像微信名“蝙蝠俠”一樣,，王林發(fā)希望能盡自己的一份力，讓被疫情打亂的世界回到正軌,，再次煥發(fā)生機(jī),。

SARS康復(fù)者接種新冠疫苗后產(chǎn)生“超級免疫力”

這項由杜克—新加坡國立大學(xué)醫(yī)學(xué)院和國家傳染病中心開展的研究，分別對10名未接種疫苗的SARS康復(fù)者（SARS-CoV–1patients）,、10名接種1劑疫苗的SARS康復(fù)者（SARS-CoV-1–vaccinated）,、8名接種2劑疫苗的SARS康復(fù)者（SARS-CoV-2–vaccinated）、10名接種2劑疫苗的健康參與者（Healthy–vaccinated）以及10名未接種疫苗的新冠肺炎康復(fù)者（SARS-CoV-2–patients）的血清樣本進(jìn)行研究,。樣本皆來自新加坡國家傳染病中心主導(dǎo)的“新加坡冠病疫苗免疫反應(yīng)和保護(hù)作用”（簡稱SCOPE）研究項目,。

基于王林發(fā)及團(tuán)隊此前研發(fā)的專利成果——“無病毒中和抗體檢測套組”（Surrogate Virus Neutralisation Technology），研究人員從隸屬于冠狀病毒Sarbecovirus（乙型冠狀病毒支系B）亞屬的系譜中挑選了10種病毒,，對比五組研究對象血清的中和抗體水平及50%中和抗體滴度（NT50）,。

這10種病毒分別是3種SARS病毒分支（SARS-CoV-1、蝙蝠WIV1和蝙蝠RsSHC014）,、新冠原始病毒（SARS-CoV-2）,、新冠病毒變異毒株（Alpha、Beta,、Delta）,、蝙蝠冠狀病毒（RaTG13）和穿山甲冠狀病毒（GD-1、GX-P5L）,。

研究發(fā)現(xiàn),，完成2劑新冠疫苗接種的8名SARS康復(fù)者對10種病毒產(chǎn)生了100%的抑制效率，且有較高NT50值,。其中,，有2名受試者在接種1劑后的中和抗體水平就已經(jīng)對新冠原始病毒呈現(xiàn)飽和抑制；而其余6名受試者在接種2劑后也達(dá)到了相同的中和抗體水平,。

其他組別的實驗者只會對SARS及類似病毒,，或新冠病毒及類似病毒具有極高的中和抗體，對另一類冠狀病毒的中和抗體水平則相對較低,，NT50值指數(shù)也相對較低,。

這兩個實驗證實，只有完成2劑新冠疫苗接種的SARS康復(fù)者體內(nèi)產(chǎn)生的交叉反應(yīng)型抗體對sarbecovirus亞屬的冠狀病毒存在廣譜抗病毒效應(yīng),。

研究人員推測,，這一結(jié)果與中和抗體的“交叉分化枝（cross-clade）”強化作用有關(guān)，簡單來說,，就是新冠疫苗激活了人體免疫系統(tǒng)對SARS病毒區(qū)域的記憶,，而這些“區(qū)域”同樣也存在于新冠病毒及其他冠狀病毒之中。但目前還不清楚這種免疫保護(hù)能持續(xù)多久,。

這一研究結(jié)果讓相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家們感到“備受鼓舞”,。復(fù)旦大學(xué)華山醫(yī)院感染科主任張文宏表示,，該研究對目前及未來可能的其他冠狀病毒或新冠變異株流行的疫苗接種策略提供了新的思路，但哪種免疫原順序可以誘導(dǎo)出最優(yōu)廣譜中和活性,，有待大量研究和科學(xué)的探索,。

上海市重大傳染病和生物安全研究院副院長、復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)衛(wèi)健委和教育部重點實驗室常務(wù)副主任謝幼華向澎湃新聞（www.thepaper.cn）表示,，該研究展現(xiàn)了積累病人資料,，建立長期臨床隊列的必要性。從病毒學(xué)角度來看,，提示不同冠狀病毒的序貫免疫可能誘生廣譜中和抗體,，不同冠狀病毒S蛋白中可能存在保守的表位（抗體的結(jié)合區(qū)域，編者注）,，針對保守表位的中和抗體可能中和多種冠狀病毒及新冠病毒的變異株,。

但謝幼華也指出，該研究檢測方法局限于蛋白之間相互結(jié)合,，離真實活病毒感染可能有一定距離,，患者樣本量較小，有待進(jìn)一步深入研究,。

王林發(fā)：廣譜新冠疫苗有望年底出世

王林發(fā)出生于上海,，1982年從華東師范大學(xué)生物系畢業(yè)后，先后前往美國和澳大利亞深造,，扎根鉆研新生病毒及新生感染性疾病研究,，在Hendra病毒、Nipah病毒和SARS病毒等方面獲得領(lǐng)先的研究成就,，目前定居于新加坡,。新冠疫情暴發(fā)后，王林發(fā)聯(lián)合多國科學(xué)家,，持續(xù)開展相關(guān)研究工作,。

杜克—新加坡國立大學(xué)醫(yī)學(xué)院教授、澳大利亞技術(shù)科學(xué)與工程院院士,、美國微生物科學(xué)院院士王林發(fā),，受訪者供圖

澎湃新聞：有研究表明，亞屬內(nèi)不同病毒RBD結(jié)構(gòu)和功能改變都是有限的,。是否意味需要關(guān)注的突變株也是有限的呢,？還有觀點認(rèn)為SARS患者接種疫苗后抗體更廣，是否與SARS病情更重，免疫反應(yīng)更強烈有關(guān)呢,？

王林發(fā)：冠狀病毒極易發(fā)生突變,，所謂的“有限”，指的是達(dá)到某個程度,。我認(rèn)為從現(xiàn)在來看,，這個跨度至少是目前變種的十至二十倍。第二個觀點很有意思,，但現(xiàn)在基本上排除了這種可能性。判斷抗體的指標(biāo)有兩個,，一個是量,，另一個是質(zhì)。SARS病人病情更重,，他們體內(nèi)產(chǎn)生的中和抗體量較高,，但這些抗體沒有發(fā)生質(zhì)的變化。我認(rèn)為,，假如我們給新冠康復(fù)的病人,，或打過新冠疫苗的健康者注射含SARS病毒的人工疫苗，則可以達(dá)到同樣的“質(zhì)變”,，誘導(dǎo)或激發(fā)廣譜的中和抗體,。

澎湃新聞：是什么契機(jī)，讓您想到給SARS康復(fù)者接種新冠疫苗,？

王林發(fā)：我過去在澳大利亞工作期間,，曾研究過比新冠病毒更具有殺傷力的Hendra 和Nipah病毒。當(dāng)時,，我們發(fā)現(xiàn)一些幸存者的血液中存在很高的中和抗體,，這些抗體能夠交叉中和兩個不同的病毒。

我和武漢病毒所是科研合作關(guān)系,，每年都會前往武漢三四次,。2020年1月14日，新冠疫情剛暴發(fā),，我正好去武漢參加預(yù)定的會議,，當(dāng)時外界對新冠病毒的了解還很匱乏。但我被告知這種病毒侵入人體的方式和SARS病毒幾乎如出一轍,。當(dāng)時我們就幾乎肯定,，這就是隸屬于Sarbecovirus亞屬的一種新的冠狀病毒。

1月18日回到新加坡后,，我就和新加坡衛(wèi)生部商議招募事宜,。我們發(fā)現(xiàn)SARS康復(fù)者體內(nèi)依舊存在中和抗體，但只能中和SARS，不能中和新冠病毒,。 我當(dāng)時就想有什么方法可以誘導(dǎo)能夠交叉中和不同的冠狀病毒的抗體,？

新冠疫苗出來后，這個心結(jié)解開了,，實驗證明,，冠狀病毒不僅可以交叉中和，而且范圍十分廣泛,。

澎湃新聞：測中和抗體是一個具有挑戰(zhàn)的技術(shù),，您是如何攻克的？

王林發(fā)：一直以來外界對于疫苗研發(fā)爭論比較多的是采用中和抗體還是T細(xì)胞,。我從技術(shù)手段判斷,，前者雖然難，但可行,。

去年3月,，我申請了一個專利，也就是在本次試驗中起到關(guān)鍵作用的“無病毒中和抗體檢測套組”——用生化方法（蛋白）模擬中和抗體,，而非使用活體病毒,。

基于這個技術(shù)，我們與金斯瑞生物科技股份有限公司和新加坡的DxD公司研發(fā)了當(dāng)時世界上唯一一個能夠檢測中和抗體的試劑盒（cPass）,，但只能測試從武漢獲得的野生病毒,。之后，我們升級技術(shù),，推出了”Multiplex sVNT”——取病人指尖的一滴血,，就可以用一個試劑盒檢測出10種至20種不同病毒的中和抗體。

事實上,，這個專利的靈感,，來源于我十三年前的科研經(jīng)歷。除了剛才提到Hendra病毒,，馬來西亞的Nipah也屬于高致病性病毒,，二者都來源于蝙蝠，死亡率高達(dá)百分之五十至百分之百,。但幸好這兩種病毒當(dāng)時只在某些地區(qū)流行,，并沒有在全球范圍內(nèi)大規(guī)模暴發(fā)，否則后果不堪設(shè)想,。

當(dāng)時全世界僅有幾個P4實驗室,，一個就在我在澳大利亞工作的研究所。得益于先進(jìn)的科研環(huán)境,，讓我有機(jī)會摸索無病毒測試中和抗體的新方法,。

新冠疫情的暴發(fā),，從某種程度來說，成為我展現(xiàn)成果的契機(jī),。從迸發(fā)靈感,、發(fā)表論文，申請專利,，獲得審批證書,，到產(chǎn)品上市，“無病毒中和抗體檢測套組”的誕生和應(yīng)用只用了70多天,，在很多同行的眼里,，這幾乎是不可能的事情，但我們做到了,。我也經(jīng)常和學(xué)生說,，做科研，需要機(jī)會,，更離不開儲備。機(jī)會來臨,，要抓得住,。

澎湃新聞：您的研究團(tuán)隊正在招募更多的SARS康復(fù)病患，您認(rèn)為比較理想的研究規(guī)模是多少,？在中國有沒有已經(jīng)開展或者有意向的合作,？

王林發(fā)：相比規(guī)模，更重要的是研究對象的多樣性,。目前全球上市的疫苗主要有4種類型,，除了我們已經(jīng)試驗的輝瑞疫苗，我希望招募更多打了滅活疫苗,、腺病毒載體疫苗和重組蛋白疫苗的受試者,，可以幫助我們進(jìn)一步研發(fā)作為加強針的廣譜新冠疫苗。未來,，我希望至少生產(chǎn)出4種類型的廣譜疫苗,，滿足全世界不同人群的需求。

中國國內(nèi)的SARS病患基數(shù)大,，國藥或科興的滅活疫苗接種覆蓋面廣,，所以我非常希望能和中國的科研人員，醫(yī)藥公司或藥廠合作,，也希望招募更多來自國內(nèi)的受試者,。

澎湃新聞：您如何自我評價此次發(fā)表的研究成果？接下來有什么計劃,？

王林發(fā)：我們發(fā)表的這篇文章里采用的研究技術(shù)已經(jīng)申請了專利,，目前和亞洲、歐洲一些制藥公司也開始洽談廣譜新冠疫苗的研發(fā)事宜。如果一切進(jìn)展順利,，那么采用這一技術(shù)的mRNA疫苗加強針有望在今年年底至明年上半年推出,，其他類型的疫苗相比也會慢一些。但研發(fā)速度還是要看制藥公司,，從疫苗是生產(chǎn)到臨床上市,，涉及諸多環(huán)節(jié)和潛在難點。

比如,，我們的試驗是根據(jù)先有SARS感染,，后有新冠疫苗的時間線來設(shè)計的。但現(xiàn)在面對的難點是,，需要改變次序,，也就是說，先接種新冠疫苗,，再接種和SARS病毒相似的人工疫苗,，觀察是否能產(chǎn)生同樣的結(jié)果，一步步驗證廣譜性,。我們現(xiàn)在已經(jīng)展開動物實驗,，假如成功，就可以進(jìn)行人體實驗了,。

從長遠(yuǎn)來看,，廣譜新冠疫苗的推出，一方面可以幫助世界各國重開國門,，恢復(fù)世界的正常運轉(zhuǎn),，走出新冠帶來的危害和陰影，另一方面,，也能預(yù)防未來其他Sarbecovirus冠狀病毒的大規(guī)模暴發(fā),。

2005年，我發(fā)現(xiàn)SARS來源于蝙蝠,，接下來,，借助”無病毒中和抗體檢測套組”，我希望能夠檢測全球范圍內(nèi)一些合作單位保存下來的人和動物的血清,，一步步回溯,，找到新冠病毒的最初起源，解開我一直以來的心病,。